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ELISA檢測(cè)試劑盒ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在科研上得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢查作用影響較大,如不留意,有也許致使顯色不全、花板等成果。
下面將操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)疑問(wèn)解決辦法總結(jié)如下:試劑要選擇質(zhì)量的檢查試劑,嚴(yán)厲依照試劑說(shuō)明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。標(biāo)本收集與保留:防止運(yùn)用肉眼可見(jiàn)的溶血標(biāo)本、高脂標(biāo)本和混濁標(biāo)本;2-8℃下,標(biāo)本可放置24-48小時(shí),長(zhǎng)時(shí)間保留需放置-20℃下,請(qǐng)防止重復(fù)凍融。
ELISA檢測(cè)試劑盒詳細(xì)請(qǐng)參照:
1.洗滌液:用前,有的試劑盒會(huì)標(biāo)明,配好的4度下一般能夠放一個(gè)月,假如沒(méi)有標(biāo)明,盡量用新鮮的,不要多;
2.顯色液(有A液和B液的),用前15分鐘;
3.規(guī)范品:有的試劑盒中規(guī)范品是現(xiàn)已好的,4度保留,有的是要現(xiàn)的,依照說(shuō)明書操作;
4.濃縮的二抗和HRP:假如需求,試劑盒沒(méi)注明配好能夠保留多久的話,盡量現(xiàn)配現(xiàn)用(用前15分鐘);原則是試劑盒上沒(méi)有指出物的貯藏方式的話,應(yīng)當(dāng)現(xiàn)配現(xiàn)用;不要怕麻煩;還有小瓶的管子開(kāi)蓋前要離心,避免蓋子上粘連今后總量不行;
5.加樣:室溫溫育的試劑,格外是溫育時(shí)間比較短的試驗(yàn)操作的試劑,加樣對(duì)數(shù)據(jù)的影響比較大,格外要留意加樣疑問(wèn)。
欠好的操作原因:不會(huì)準(zhǔn)確運(yùn)用加樣器; 血清或血漿標(biāo)本別離欠好即進(jìn)行加樣;手工操作中,加樣板過(guò)多形成加樣後放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(格外是室內(nèi)溫度較高時(shí));加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺起孔外。ELISA檢測(cè)試劑盒
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