抗Ⅲ抗體Elisa試劑盒?甲狀腺冰凍切片操作方法
1. 主要試劑與儀器
0.5%氨水返藍液抗Ⅲ抗體Elisa試劑盒?、Gill改良蘇木精染液、0.5%~1%鹽酸乙醇分化液、1%醇溶性伊紅染液、甲醇醋酸混合固定液(甲醇50ml、冰醋酸2.5ml)、各梯度乙醇溶液、二甲苯及中性樹膠均
2.操作方法
冷凍機溫度為-15℃~-18℃。將新鮮活體組織塊切成1.5cm×1.5cm×0.3cm大小,速凍,切片厚度為5μm。粗修組織塊,然后細修切面,再用戴手套手的大拇指或大魚際肌在切面上溫暖2~3s,動作稍慢而勻速。抗Ⅲ抗體Elisa試劑盒?切片制成后立即放入甲醇醋酸混合固定液固定0.5~1min后水洗,Gill改良蘇木精染胞核1~3min后水洗,0.5%~1%鹽酸乙醇分化液分化1~2次后水洗,0.5%氨水返藍2s后水洗,1%醇溶性伊紅染胞質10s,逐級梯度乙醇快速脫水,中性樹膠封固[1-2]。
3.結果
3.1 取材浸水對組織HE染色效果的影響
組織浸水后鏡下出現冰晶及類似氣泡樣的“黑水珠”,按壓不會消失;未浸水組織結構完整,未見上述現象。
3.2 冷凍溫度對組織
冷凍溫度過低時,鏡下出現甲狀腺膠質染色不均勻,甚至出現多量大小不一的空泡;溫度適宜時,組織結構清晰完整、細胞無明顯膨脹、極少有冰晶形成。
3.3 復溫對組織
HE染色效果未復溫時,鏡下顯示濾泡與濾泡之間出現收縮裂隙;復溫后無收縮裂隙情況出現。
3.4 固定液對組織
固定液中未加冰醋酸時,鏡下顯示膠質收縮,皺褶形成,膠質與濾泡上皮脫落,出現空暈;加冰醋酸后,組織結構清晰,核著色清楚,核漿對比度好,組織無皺縮現象發(fā)生。
3.5 染色對組織
抗Ⅲ抗體Elisa試劑盒?染色不充分時,鏡下顯示組織色澤偏紅,核對比度不強,影響診斷;染色充分后,鏡下組織結構清晰完整,核漿紅藍對比鮮明。
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