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倉(cāng)鼠γ干擾素IFNG酶聯(lián)檢測(cè)試劑盒樣本無(wú)法計(jì)算到數(shù)值
1 標(biāo)曲選擇不合適選擇合適的標(biāo)曲擬合;
2 樣本含量很低,低于靈敏度無(wú)法被檢測(cè)到嘗試濃縮樣本或使用高敏ELISA試劑盒檢測(cè)
3樣本含量很高,超過(guò)標(biāo)曲建議進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)摸索稀釋倍數(shù),確保樣本OD值落在標(biāo)曲范圍內(nèi)標(biāo)曲高濃度間無(wú)明顯趨勢(shì)
1如OD值靠譜,但是僅無(wú)梯度,則顯色過(guò)度TMB顯色體系中建議根據(jù)S1,S2顏色進(jìn)行判斷,當(dāng)S1,S2深藍(lán)色,有明顯梯度,S5有淡藍(lán)色時(shí)即可終止。
2僅作單波長(zhǎng)檢測(cè)。由于參考波長(zhǎng)讀取非特異性檢測(cè),如指紋、劃痕、水漬等,對(duì)結(jié)果也有影響。建議終結(jié)果以雙波長(zhǎng)為準(zhǔn)確。
特點(diǎn):
1.專一性強(qiáng)。抗原與抗體的免疫反應(yīng)是專一反應(yīng),而免疫酶技術(shù)以免疫反應(yīng)為基礎(chǔ),所檢測(cè)的對(duì)象是抗原(或抗體),使用的抗體除標(biāo)記了酶以外,與普通抗體的免疫反應(yīng)特性并無(wú)多大差別。
2.靈敏度高。由于抗體聯(lián)結(jié)上了酶,因此,借助于酶與底物的顯色反應(yīng),顯示抗原與抗體的結(jié)合,大大提高了檢測(cè)的靈敏性,使檢測(cè)水平接近放射免疫測(cè)定法。
3.樣品易保存。經(jīng)過(guò)酶反應(yīng)顯示的有色產(chǎn)物大多比較穩(wěn)定,因此有利于樣品的保存。
4.結(jié)果易觀察。對(duì)檢測(cè)結(jié)果即可用肉眼觀察,又可用顯微鏡觀察,也可以用分光光度計(jì)進(jìn)行比色測(cè)定,還可用顯微鏡觀察。這是因?yàn)槟承┟阜磻?yīng)產(chǎn)物能使電子密度發(fā)生改變,從而引起被檢測(cè)物的顯示。
5.可以定量測(cè)定。溶液中的抗原物質(zhì),應(yīng)用酶免吸附技術(shù)進(jìn)行比色測(cè)定,依據(jù)光密度值的變化,可以定量。預(yù)計(jì)用細(xì)胞分光光度計(jì)可對(duì)組織內(nèi)的抗原進(jìn)行免疫酶技術(shù)的定量測(cè)定。
6.可以大規(guī)模測(cè)定樣品。如有成千上萬(wàn)份樣品需要進(jìn)行檢測(cè),免疫酶技術(shù)都能在較短時(shí)間內(nèi)完成。
7.儀器和試劑簡(jiǎn)單。對(duì)免疫沒技術(shù)來(lái)說(shuō),不需要熒光顯微鏡,也不需要測(cè)定放射性的特殊儀器,所用儀器及試劑均屬一般性儀器與試劑,普通實(shí)驗(yàn)室及應(yīng)用單位均易購(gòu)置.