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細(xì)胞簡介：

膀胱逼尿肌具有一定外加張力作用下自發(fā)興奮收縮的能力，且不能被神經(jīng)阻滯抑制，說明膀胱可以發(fā)生肌源性的收縮，有學(xué)者用組化的方法在膀胱內(nèi)發(fā)現(xiàn)了與胃腸道 Cajal間質(zhì)細(xì)胞類似的細(xì)胞。目前學(xué)術(shù)界普遍認(rèn)為Cajal細(xì)胞在膀胱中充當(dāng)起搏細(xì)胞的角色，Cajal細(xì)胞存在于膀胱平滑肌束周圍，與神經(jīng)關(guān)系密切。

細(xì)胞特性：

1）組織來源于實(shí)驗(yàn)動物的正常膀胱組織。

2)細(xì)胞鑒定：c-kit熒光染色為陽性。

3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。

5)細(xì)胞生長方式：梭形細(xì)胞，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。

推薦培養(yǎng)基：

我們推薦使用 Delf原代間質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠CC趨化因子受體9(CCR9)檢測試劑盒 ，英文名： CCR9 ELISA Kit

Rabbit tissue type plasminogen activator (t-PA) ELISA Kit 兔子組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)檢測試劑盒

MousegranzymesB,Gzms-BELISAKit 小鼠顆粒酶B(Gzms-B)檢測試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumaniggeringReceptorExpressesonMyeloidCells-1,EM-1ELISAKit人髓系細(xì)胞觸發(fā)受體-1

通用型鹽含量熒光定量檢測試劑盒

ELISAKitGFAP大鼠神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白

HA重組甲型流感 H5N1 (A/Duck/Hong Kong/p46/97) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

Resistin 抵抗素抗原 0.5mgResistin 抵抗素抗原

EFNA3重組人 Ephrin-A3 / EFNA3 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

ANXA8 Protein Human 重組人 Annexin A8 / ANXA8 蛋白 (His 標(biāo)簽)

CSF3R Protein Human 重組人 G-CSFR / CD114 / CSF3R 蛋白

Resistin 抵抗素抗原 0.5mgResistin 抵抗素抗原

ANXA8 Protein Human 重組人 Annexin A8 / ANXA8 蛋白 (His 標(biāo)簽)

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CSF3R Protein Human 重組人 G-CSFR / CD114 / CSF3R 蛋白

EFNA3重組人 Ephrin-A3 / EFNA3 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

豬基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA 試劑盒

Human collagenase II (Collagenase II) ELISA Kit 人膠原酶II(Collagenase II)檢測試劑盒

PorcineEsadiolreceptor,ERELISAKit 豬雌二醇受體(ER)檢測試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitforAlpha-SMA(HumanAlpha-Smoothmuscleactin)ELISAKit人α平滑肌肌動蛋白

血液肌酐(CREATININE)酶連續(xù)反應(yīng)比色法定量檢測試劑盒20次

Plaphosphatidylglycerol,PGELISAKit植物0脂酰甘油(PG)檢測試劑盒

小鼠膀胱間質(zhì)細(xì)胞豬端粒酶(TE)ELISAKit   ELISA. 

豬促生長激素釋放激素(GHRH)ELISAKit   ELISA. 

豬促卵泡素(FSH)ELISAKit   ELISA. 

豬Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)ELISAKit   ELISA.

注意事項(xiàng)：

1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題，責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。

3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題，部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正?，F(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。

4. 貼壁細(xì)胞可以消化，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細(xì)胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑?，個別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細(xì)胞僅供科研使用。

8. 備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議1：2傳代 。

9.注意： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。