產品名稱:Rb細胞,人視網膜母細胞瘤說明書
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產品型號:
更新日期:2021-03-23
訪問次數(shù):466
Rb細胞,人視網膜母細胞瘤說明書的詳細資料:
下列是產品的訂購信息:
產品名稱 | Rb細胞,人視網膜母細胞瘤說明書 |
英文名稱 | Rb cells, a human retinoblastoma |
貨號 | EY-X64031 |
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài)、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據(jù)實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。
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培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
文多靈 CAS 2182-14-1 規(guī)格:20mg 訂購|咨詢
卡維丁 CAS 32728-75-9 規(guī)格:20mg 訂購|咨詢
苯甲酰次原堿 CAS 規(guī)格:20mg 訂購|咨詢
大黃素甲 CAS 521-61-9 規(guī)格:HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
衛(wèi)矛醇 CAS 608-66-2 規(guī)格:20mg 訂購|咨詢
808猩紅 CAS 規(guī)格:10mg/支 訂購|咨詢
白花前胡醇;Ulopterol CAS 28095-18-3 規(guī)格:20mg 訂購|咨詢
熊果苷 CAS 497-76-7 規(guī)格:20mg 訂購|咨詢
二氫歐山芹素 CAS 3804-70-4 規(guī)格:20mg 訂購|咨詢
平貝母 CAS 規(guī)格:5g 訂購|咨詢
2-金剛烷 CAS 700-58-3 規(guī)格:20mg 訂購|咨詢
Rb細胞,人視網膜母細胞瘤說明書羅丹明標記的兔抗水貂IgGRabbit Anti-Mink IgG/RBITC 0.1ml
膠體金標記的兔抗水貂IgGRabbit Anti-Mink IgG/Gold 0.5ml
羅丹明標記的驢抗人IgGDonkey Anti-human IgG/RBITC 0.1ml
膠體金標記的驢抗人IgGDonkey Anti-human IgG/Gold 0.5ml
FITC標記的驢抗人IgGDonkey Anti-human IgG/FITC 0.3ml
辣根過氧化物酶標記的驢抗人IgGDonkey Anti-human IgG/HRP 0.1ml
堿性磷酸酶(AP)標記的驢抗人IgGDonkey Anti-human IgG/AP 0.1ml
標記的驢抗人IgGDonkey Anti-human IgG/Bio 0.1ml
Alexa Fluor 555標記的驢抗人IgGDonkey Anti-human IgG/Alexa Fluor 555 0.1ml
Alexa Fluor 647標記的驢抗人IgGDonkey Anti-human IgG/Alexa Fluor 647 0.1ml
PE-Cy5.5標記的驢抗人IgGDonkey Anti-human IgG/PE-Cy5.5 0.1ml
細胞培養(yǎng)方法:
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
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