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產(chǎn)品名稱:線粒體染色試劑盒(綠色熒光)
產(chǎn)品特點(diǎn):線粒體染色試劑盒(綠色熒光)的相關(guān)產(chǎn)品:DBH (Dopamine- Beta-Hydroxylase 0.5mgDBH (Dopamine- Beta-Hydroxylase) 多巴胺β羥化酶(抗原)FAM3B Protein Human 重組人 FAM3B 蛋白 CSF1R重組大鼠 CSF1R / MCSF Receptor / CD115 蛋白 (His 標(biāo)簽) ProteinTIMD
產(chǎn)品型號:
更新日期:2024-11-19
訪問次數(shù):19
線粒體染色試劑盒(綠色熒光)的詳細(xì)資料:
產(chǎn)品僅供研究使用,不適用于人類或臨床診斷
商品屬性:
產(chǎn)品英文名稱:Mitochondrion Staining Kit (Green Fluorescence)
產(chǎn)品中文名稱:線粒體染色試劑盒(綠色熒光)
規(guī)格:100 T/500 T/2000 T
貨號:EY-01X8557
用途:僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
特點(diǎn)&優(yōu)勢:
• 能夠在多種哺乳動物細(xì)胞類型中進(jìn)行線粒體染色,主要是活細(xì)胞,包含懸浮細(xì)胞或貼壁細(xì)胞。
• 針試劑盒針對各種熒光分析平臺進(jìn)行了優(yōu)化,具有廣泛的適用性,如熒光微孔板分析,流式細(xì)胞儀和熒光顯微鏡等。
• 的MitoGreen• (Ex/Em = 490/523 nm)- 對線粒體膜電位勢能的依賴性更低。
保存建議:請參閱說明書中各個組分的存儲條件。自發(fā)貨之日起,在推薦溫度下至少穩(wěn)定6個月。
運(yùn)輸條件:藍(lán)冰運(yùn)輸
背景
線粒體是一種雙膜結(jié)合的細(xì)胞器,存在于大多數(shù)真核細(xì)胞中。線粒體的功能是提供細(xì)胞能量。此外,線粒體參與其他任務(wù),如信號傳遞、細(xì)胞分化和細(xì)胞死亡,以及維持對細(xì)胞周期和細(xì)胞生長的控制。線粒體與多種人類疾病有牽連,包括線粒體疾病、心臟疾病、心力衰竭和孤癥。線粒體可能在這些細(xì)胞過程中發(fā)揮重要作用。
本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):
1.操作簡便、快捷??芍苯蛹尤氲綑z測平板。在96-孔板中檢測時(shí),無需洗滌或收獲細(xì)胞,免去溶解步驟。
2. 無放射性。不需要配制液閃混合物,也不需要處理廢棄物。
3. 與MTT相比,使用更安全。不需要使用揮發(fā)性的有機(jī)溶劑來溶解甲臜產(chǎn)物。
4. 操作靈活,與MTT不同,平板讀數(shù)后可放回溫箱繼續(xù)孵育,使顏色進(jìn)一步生成。
操作步驟:
(一)獲得目的基因
1、通過PCR方法:以含目的基因的克隆質(zhì)粒為模板,按基因序列設(shè)計(jì)一對引物(在上游和下游引物分別引入不同的酶切位點(diǎn)),PCR循環(huán)獲得所需基因片段。
2、通過RT-PCR方法:用TRIzol法從細(xì)胞或組織中提取總RNA,以mRNA為模板,逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA第一鏈,以逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為模板進(jìn)行PCR循環(huán)獲得產(chǎn)物。
(二)構(gòu)建重組表達(dá)載體
1、載體酶切:將表達(dá)質(zhì)粒用限制性內(nèi)切酶(同引物的酶切位點(diǎn))進(jìn)行雙酶切,酶切產(chǎn)物行瓊脂糖電泳后,用膠回收Kit或凍融法回收載體大片段。
2、PCR產(chǎn)物雙酶切后回收,在T4DNA連接酶作用下連接入載體。
(三) 獲得含重組表達(dá)質(zhì)粒的表達(dá)菌種
1、 將連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5α,根據(jù)重組載體的標(biāo)志(抗Amp或藍(lán)白斑)作篩選,挑取單斑,堿裂解法小量抽提質(zhì)粒,雙酶切初步鑒定。
2、 測序驗(yàn)證目的基因的插入方向及閱讀框架均正確,進(jìn)入下步操作。否則應(yīng)篩選更多克隆,重復(fù)亞克隆或亞克隆至不同酶切位點(diǎn)。
3、 以此重組質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)化表達(dá)宿主菌的感受態(tài)細(xì)胞。
(四)誘導(dǎo)表達(dá)
1、挑取含重組質(zhì)粒的菌體單斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃過夜培養(yǎng)。
2、按1∶50比例稀釋過夜菌,一般將1ml菌加入到含50mlLB培養(yǎng)基的300ml培養(yǎng)瓶中, 37℃震蕩培養(yǎng)至OD600≌0.4-1.0(*0.6,大約需3hr)。
3、取部分液體作為未誘導(dǎo)的對照組,余下的加入IPTG誘導(dǎo)劑至終濃度0.4mM作為實(shí)驗(yàn)組,兩組繼續(xù)37℃震蕩培養(yǎng)3hr。
4、分別取菌體1ml, 離心12000g×30s收獲沉淀,用100μl 1%SDS重懸,混勻, 70℃10min。
5、離心12000g×1min,取上清作為樣品,可做SDS-PAGE等分析。
公司正在出售的產(chǎn)品:
ADFP/ADRP/adipophilin 脂肪組織分化相關(guān)蛋白抗原 0.5mgADFP/ADRP/adipophilin 脂肪組織分化相關(guān)蛋白抗原
FCGR3A Protein Human 重組人 CD16a / FCGR3A 蛋白 (176 Phe, His & AVI 標(biāo)簽), Biotinylated
IL36A重組小鼠 IL-1F6 / IL-1 epsilon 蛋白 Protein
EPHA4 Protein Rat 重組大鼠 EphA4 蛋白
PROK1重組人 EG-VEGF / prokineticin-1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
小鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)ELISA 試劑盒
Rat endothelial niic oxide syhase (eNOS) ELISA Kit 大鼠內(nèi)皮型合成酶(eNOS)檢測試劑盒
Human2,3-dinohromboxaneB2,2,3-dinor-TXB2ELISAKit 人2,3Dinor血栓烷B2(2,3-dinor-TXB2)檢測試劑盒 進(jìn)口分裝
HumanapoproteinB100,apo-B100檢測試劑盒人載脂蛋白B100(apo-B100)檢測試劑盒
植物葉綠體總蛋白定量檢測試劑盒20次
Humaissue-typePlasiminogenActilyse,t-PAELISAKit人組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)檢測試劑盒
線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅱ活性測試盒 可見分光光度法 25管/24樣
線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅲ活性測試盒 可見分光光度法 25管/24樣
線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅳ活性測試盒 可見分光光度法 25管/24樣
α戊二酸脫氫酶(α-KGDH)試劑盒 紫外分光光度法 50管/48樣
大鼠類固醇5α還原酶2(SRD5α2)檢測試劑盒 ,英文名: SRD5α2 ELISA Kit
Mouse free three iodothyronine (Free-T3) ELISA Kit 小鼠游離三甲狀腺原(Free-T3)檢測試劑盒
Ratai-cardiolipinaibodyIgA,ACA-IgAELISAKit 大鼠抗心0脂抗體IgA(ACA-IgA)檢測試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforGABAELISAKit大鼠γ氨基
細(xì)胞過氧化氫酶(CATALASE)催化活性比色法定量檢測試劑盒20次
RatProgesteronereceptor,PROGRELISAKit小鼠孕同受體(PROGR)檢測試劑盒
線粒體染色試劑盒(綠色熒光)IL36A重組小鼠 IL-1F6 / IL-1 epsilon 蛋白 Protein
ADFP/ADRP/adipophilin 脂肪組織分化相關(guān)蛋白抗原 0.5mgADFP/ADRP/adipophilin 脂肪組織分化相關(guān)蛋白抗原
PROK1重組人 EG-VEGF / prokineticin-1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
FCGR3A Protein Human 重組人 CD16a / FCGR3A 蛋白 (176 Phe, His & AVI 標(biāo)簽), Biotinylated
EPHA4 Protein Rat 重組大鼠 EphA4 蛋白
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