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產(chǎn)品僅供研究使用，不適用于人類或臨床診斷
商品屬性：

產(chǎn)品英文名稱：SuperKine™ Lipo3.0 Efficient Transfection Reagent

產(chǎn)品中文名稱：Lipo3.0高效轉(zhuǎn)染試劑

規(guī)格：0.5 mL/1.5 mL/1.5 mL×5

貨號：EY-01X8586
用途：僅供科研研究實驗

特點&優(yōu)勢:

• 轉(zhuǎn)染效率高：對常規(guī)的動物細胞，如HEK293，HeLa等轉(zhuǎn)染效率高達90-95%。

• 兼容性強：不受血清和抗生素的影響，轉(zhuǎn)染前后可不更換培養(yǎng)基。

產(chǎn)品形式:液體形式

保存建議：4℃，保存12個月。

運輸條件:藍冰運輸

本產(chǎn)品具有下列特點:

 1.操作簡便、快捷?？芍苯蛹尤氲綑z測平板。在96-孔板中檢測時,無需洗滌或收獲細胞,免去溶解步驟。

2. 無放射性。不需要配制液閃混合物,也不需要處理廢棄物。

3. 與MTT相比,使用更安全。不需要使用揮發(fā)性的有機溶劑來溶解甲臜產(chǎn)物。

4. 操作靈活,與MTT不同,平板讀數(shù)后可放回溫箱繼續(xù)孵育,使顏色進一步生成。
公司正在出售的產(chǎn)品：

Annexin A 膜粘連蛋白 A抗原 0.5mgAnnexin A 膜粘連蛋白 A抗原

EPOR & CD131 Protein Human 重組人 EPOR & CD131 Homodimer 蛋白

JAM2重組小鼠 JAM-2 / JAM-B 蛋白 (Fc 標簽)(Fc 標簽) Protein

CD59 Protein Rat 重組大鼠 CD59 / CD59A / MAC-IP 蛋白 (Fc 標簽)

ADIPOQ重組人 Adiponectin / Acrp30 / ADIPOQ 蛋白 (Fc 標簽) Protein

小鼠肌肉生長抑制素/肌抑素(MSTN)檢測試劑盒 96T/48T

Rat Clara cell protein (CC16) ELISA Kit 大鼠克拉拉細胞蛋白(CC16)檢測試劑盒

Humandecay-acceleratingfactor,DAFELISAKit 人降解加速因子(DAF)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humanai-livercellmembraneaibody,LMA檢測試劑盒人抗肝細胞膜抗體(LMA)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物膜性囊泡(RSOV和IOV)制備試劑盒20次

HumanVaricellazostervirusIgG，VZV-IgGELISAKit人水痘帶狀皰疹病毒IgG(VZV-IgG)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠白介素-23(mouse IL-23)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

小鼠白介素-27(mouse IL-27)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

小鼠胰島素(mouse Insulin)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

小鼠抑制素A(mouse Inhibin A)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

大鼠白介素9(IL-9)檢測試劑盒 ，英文名： IL-9 ELISA Kit

Mouse ierleukin 12 (IL-12/P70) ELISA Kit 小鼠白介素12(IL-12/P70)檢測試劑盒

ELISA 小鼠GRO(mouse GRO)  進口分裝

CLIAKitfori-PTH(HumaniactParathormone)ELISAKit人全段甲狀旁腺素

通用型非蛋白/游離巰基含量熒光定量檢測試劑盒20次

ELISAKitLBP大鼠脂多糖結(jié)合蛋白

Lipo3.0高效轉(zhuǎn)染試劑RETN重組小鼠 Resistin / ADSF / RETN 蛋白 (Fc 標簽) Protein

白細胞關(guān)聯(lián)免疫球蛋白樣受體2(LAIR2)重組蛋白 Recombinant Leukocyte Associated Immunoglobulin Like Receptor 2 (LAIR2)

MERTK重組人 MERTK / Mer (aa 578-872) 蛋白 Protein

EPOR & CD131 Protein Human 重組人 EPOR & CD131 Homodimer 蛋白

REG1B Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 REG1B / PSPS2 蛋白 (Fc 標簽)

操作步驟：

(一)獲得目的基因

1、通過PCR方法:以含目的基因的克隆質(zhì)粒為模板,按基因序列設(shè)計一對引物(在上游和下游引物分別引入不同的酶切位點),PCR循環(huán)獲得所需基因片段。

2、通過RT-PCR方法:用TRIzol法從細胞或組織中提取總RNA,以mRNA為模板,逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA第一鏈,以逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為模板進行PCR循環(huán)獲得產(chǎn)物。

(二)構(gòu)建重組表達載體

1、載體酶切:將表達質(zhì)粒用限制性內(nèi)切酶(同引物的酶切位點)進行雙酶切,酶切產(chǎn)物行瓊脂糖電泳后,用膠回收Kit或凍融法回收載體大片段。

2、PCR產(chǎn)物雙酶切后回收,在T4DNA連接酶作用下連接入載體。

(三)  獲得含重組表達質(zhì)粒的表達菌種

1、 將連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5α,根據(jù)重組載體的標志(抗Amp或藍白斑)作篩選,挑取單斑,堿裂解法小量抽提質(zhì)粒,雙酶切初步鑒定。

2、 測序驗證目的基因的插入方向及閱讀框架均正確,進入下步操作。否則應(yīng)篩選更多克隆,重復(fù)亞克隆或亞克隆至不同酶切位點。

3、 以此重組質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)化表達宿主菌的感受態(tài)細胞。

(四)誘導(dǎo)表達

1、挑取含重組質(zhì)粒的菌體單斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃過夜培養(yǎng)。

2、按1∶50比例稀釋過夜菌,一般將1ml菌加入到含50mlLB培養(yǎng)基的300ml培養(yǎng)瓶中, 37℃震蕩培養(yǎng)至OD600≌0.4-1.0(*0.6,大約需3hr)。

3、取部分液體作為未誘導(dǎo)的對照組,余下的加入IPTG誘導(dǎo)劑至終濃度0.4mM作為實驗組,兩組繼續(xù)37℃震蕩培養(yǎng)3hr。

4、分別取菌體1ml, 離心12000g×30s收獲沉淀,用100μl 1%SDS重懸,混勻, 70℃10min。

5、離心12000g×1min,取上清作為樣品,可做SDS-PAGE等分析。