產(chǎn)品名稱:重組人巨噬細胞遷移抑制因子(MIF)
產(chǎn)品特點:重組人巨噬細胞遷移抑制因子(MIF)的相關產(chǎn)品:FGF-7/KGF (Keratinocyte growth factor precursor 0.5mgFGF-7/KGF (Keratinocyte growth factor precursor) 成纖維細胞生長因子-7/纖維母細胞生長因子 (抗原)CXCL12 Protein Human 重組人 CXCL12 / SDF-1
產(chǎn)品型號:
更新日期:2024-11-19
訪問次數(shù):19
重組人巨噬細胞遷移抑制因子(MIF)的詳細資料:
產(chǎn)品僅供研究使用,不適用于人類或臨床診斷
商品屬性:
產(chǎn)品英文名稱:Human MIF Protein
產(chǎn)品中文名稱:重組人巨噬細胞遷移抑制因子(MIF)
規(guī)格:10 μg/50 μg/500 μg
貨號:EY-01X8659
用途:僅供科研研究實驗
特點&優(yōu)勢:
標簽:無標簽
表達宿主:大腸桿菌
種屬:人
序列:氨基酸序列來源于:人源 MIF(Pro2-Ala115)表達的蛋白片段,N端含有一個Met和6xHis標簽。
蛋白長度:重組人MIF由115個氨基酸組成,與SDS-PAGE結果一致。
純度:> 98 % ,使用SDS-PAGE檢測
產(chǎn)品形式:凍干粉,凍干緩沖液為無菌的 PBS,pH 6.5。
基因ID:4282
使用中注意事項:本產(chǎn)品為凍干粉形式,建議將凍干粉的γ,His標簽(IFN-γ)產(chǎn)品保存于-20℃以下的干燥環(huán)境中。本產(chǎn)品溶解之后,可動?動
背景
巨噬細胞移動抑制因子(Macrophage Migration Inhibitory Factor, MIF)是一種多效的細胞因子,以同型三聚體的形式存在于體內。MIF初被鑒定為抑制巨噬細胞遷移的T細胞衍生因子。近年來,MIF因其在血管生成和腫瘤發(fā)生發(fā)展中的可能作用而受到越來越多的關注。腫瘤內MIF的表達與血管生成生長因子如白細胞介素8 (IL-8)和血管內皮生長因子(VEGF)的表達密切相關,并且與腫瘤切除術后復發(fā)風險密切相關。
本產(chǎn)品具有下列特點:
1.操作簡便、快捷??芍苯蛹尤氲綑z測平板。在96-孔板中檢測時,無需洗滌或收獲細胞,免去溶解步驟。
2. 無放射性。不需要配制液閃混合物,也不需要處理廢棄物。
3. 與MTT相比,使用更安全。不需要使用揮發(fā)性的有機溶劑來溶解甲臜產(chǎn)物。
4. 操作靈活,與MTT不同,平板讀數(shù)后可放回溫箱繼續(xù)孵育,使顏色進一步生成。
公司正在出售的產(chǎn)品:
Bassoon(BSN 0.5mgBassoon(BSN)
CA5B Protein Human 重組人 Carbonic Anhydrase VB / CA5B 蛋白 (His 標簽)
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羊表皮生長因子(EGF)ELISA 試劑盒
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CLIAKitforMousepulmonaryactivatioegulatedchemokine,PARCELISAKit小鼠肺部活化調節(jié)趨化因子
體液元素比色法定量檢測試劑盒20次
ELISAKitColⅣ人Ⅳ型膠原
重組人巨噬細胞遷移抑制因子(MIF)FKBP1A重組小鼠 FKBP12 / FKBP1A 蛋白 (His 標簽) Protein
Bassoon(BSN 0.5mgBassoon(BSN)
PTPRJ重組人 DEP1 / PTPRJ 蛋白 (aa 997-1337, His 標簽) Protein
CA5B Protein Human 重組人 Carbonic Anhydrase VB / CA5B 蛋白 (His 標簽)
CDH1 Protein Rat 重組大鼠 E-Cadherin / CDH1 / E-cad / CD324 蛋白
操作步驟:
(一)獲得目的基因
1、通過PCR方法:以含目的基因的克隆質粒為模板,按基因序列設計一對引物(在上游和下游引物分別引入不同的酶切位點),PCR循環(huán)獲得所需基因片段。
2、通過RT-PCR方法:用TRIzol法從細胞或組織中提取總RNA,以mRNA為模板,逆轉錄形成cDNA第一鏈,以逆轉錄產(chǎn)物為模板進行PCR循環(huán)獲得產(chǎn)物。
(二)構建重組表達載體
1、載體酶切:將表達質粒用限制性內切酶(同引物的酶切位點)進行雙酶切,酶切產(chǎn)物行瓊脂糖電泳后,用膠回收Kit或凍融法回收載體大片段。
2、PCR產(chǎn)物雙酶切后回收,在T4DNA連接酶作用下連接入載體。
(三) 獲得含重組表達質粒的表達菌種
1、 將連接產(chǎn)物轉化大腸桿菌DH5α,根據(jù)重組載體的標志(抗Amp或藍白斑)作篩選,挑取單斑,堿裂解法小量抽提質粒,雙酶切初步鑒定。
2、 測序驗證目的基因的插入方向及閱讀框架均正確,進入下步操作。否則應篩選更多克隆,重復亞克隆或亞克隆至不同酶切位點。
3、 以此重組質粒DNA轉化表達宿主菌的感受態(tài)細胞。
(四)誘導表達
1、挑取含重組質粒的菌體單斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃過夜培養(yǎng)。
2、按1∶50比例稀釋過夜菌,一般將1ml菌加入到含50mlLB培養(yǎng)基的300ml培養(yǎng)瓶中, 37℃震蕩培養(yǎng)至OD600≌0.4-1.0(*0.6,大約需3hr)。
3、取部分液體作為未誘導的對照組,余下的加入IPTG誘導劑至終濃度0.4mM作為實驗組,兩組繼續(xù)37℃震蕩培養(yǎng)3hr。
4、分別取菌體1ml, 離心12000g×30s收獲沉淀,用100μl 1%SDS重懸,混勻, 70℃10min。
5、離心12000g×1min,取上清作為樣品,可做SDS-PAGE等分析。
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