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① 組織塊培養(yǎng)法

組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

② 消化培養(yǎng)法

③ 懸浮細胞培養(yǎng)法

對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

④器官培養(yǎng)

器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

產(chǎn)品名稱：人腹膜毛細血管內(nèi)皮細胞

英文名稱：Human Peritoneal Capillary Endothelial Cells

組織來源：腹膜組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

人腹膜毛細血管內(nèi)皮分離自腹膜組織；腹膜是存在于高等脊椎動物腹腔中的一層黏膜，主要由間皮細胞和間質(zhì)（結(jié)締組織、纖維、毛細血管、淋巴管）構(gòu)成，藉由結(jié)締組織的支持所形成的一層膜狀組織。腹膜包覆大部分腹腔內(nèi)的器官，能分泌黏液潤濕臟器的表面，減輕臟器間的摩擦。腹腔臟器的血液、淋巴和神經(jīng)組織經(jīng)由腹膜與外界相連；腹膜也具有吸收撞擊保護內(nèi)臟的效果。腹膜（peritoneum）為全身面積大、配布復(fù)雜的漿膜，由皮及少量結(jié)締組織構(gòu)成，薄而光滑，呈半透明狀。襯于腹、盆腔壁內(nèi)表面的腹膜稱為壁腹膜（parietal-peritoneum）或腹壁薄層；覆蓋腹、盆腔器表面的部分稱為臟腹膜（visceral-peritoneum）腹膜或腹膜臟層。臟腹膜與壁腹膜互相延續(xù)、移行，共同圍成不規(guī)則的潛在性腔隙，稱為腹膜腔（peritoneal-cavity）。腹膜腔是臟、壁兩層腹膜之間相互移行圍成的潛在性間隙。腹膜腔內(nèi)有少量漿液，在臟器活動時可減少摩擦。腹膜的主要生理功能：①分泌功能；②吸收功能；③再生能力；④防御功能；⑤調(diào)理功能。臟、壁腹膜都有豐富的毛細血管，毛細血管上有不同的孔徑；腹膜的毛細血管和毛細血管后靜脈是進行溶質(zhì)交換的主要場所。

公司實驗室分離的人腹膜毛細血管內(nèi)皮采用膠原酶-聯(lián)合消化法結(jié)合化學(xué)試劑抑制法、并通過內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

公司實驗室分離的人腹膜毛細血管內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 內(nèi)皮細胞樣

傳代特性 可傳2-3代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

取材→分離→培養(yǎng)和維持

1、取材

人和動物細胞的取材是原代細胞培養(yǎng)成功的首要條件，直接影響細胞的體外培養(yǎng)。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應(yīng)嚴格無菌

③ 防止機械損傷

④ 去除無用組織和避免干燥

⑤ 應(yīng)注意組織類型、分化程度、年齡等

⑥ 作好記錄

2、分離

人或動物體內(nèi)(或胚胎組織)由于多種細胞結(jié)合緊密，不利于各個細胞在體外培養(yǎng)中生長繁殖，必須將現(xiàn)有的組織塊充分散開，使細胞解離出來。

(1)懸浮細胞的分離方法

組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細胞。

(2)實體組織材料的分離方法

對于實體組織材料，由于細胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細胞充分分散，形成細胞懸液，可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法。

① 機械分散法

特點:簡便、快速,但對組織機械損傷大，而且細胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀)，應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進一步使細胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動，使團塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時再采用機械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細胞團塊得以較充分的分散，制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液，接種培養(yǎng)后，細胞容易貼壁生長。

大鼠促腎上腺皮質(zhì)素釋放激素結(jié)合蛋白(CRHBP)檢測試劑盒 ，英文名： CRHBP ELISA Kit

P selectin (P-S 人P選擇素(P-S

Ratsolublevasccularcelladhesionmolecule1,sVCAM-1ELISAKit 大鼠可溶性血管細胞粘附分子1(sVCAM-1)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforCT-1ELISAKit大鼠心肌營養(yǎng)素1

細胞涂片巴氏(papanicolaou;PAP)染色試劑盒50次

RatEndomeiumAibody,EMAbELISAKit大鼠抗子宮內(nèi)膜抗體(EMAb)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

LYPD3重組小鼠 C4.4A / LYPD3 蛋白 Protein

Alpha-Synuclein 核突觸蛋白(抗原 0.5mgAlpha-Synuclein 核突觸蛋白(抗原)

NLK重組人 nemo-like kinase / NLK 蛋白 (His & GST 標簽) Protein

CDON Protein Human 重組人 CDON / CDO 蛋白

ENPEP Protein Rat 重組大鼠 ENPEP / Aminopeptidase A 蛋白 (aa 41-945, His 標簽)

半乳糖凝集素9(GAL9)重組蛋白 Recombinant Galectin 9 (GAL9)

CDON Protein Human 重組人 CDON / CDO 蛋白

EGFR重組小鼠 EGFR / HER1 / ErbB1 蛋白 (Fc 標簽) Protein

IL2RA Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IL2RA 蛋白

LYZL2重組人 Lysozyme 2 / LYZL2 蛋白 Protein

小鼠C(VC)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human phosphatidylinositol specific phospholipase C (PIPLC) ELISA Kit 人0酯酰肌醇特異性0酯酶C(PIPLC)檢測試劑盒

Human2,3-Disphosphoglycerate,2,3-DPGELISAKit 人2,3-二0酸甘油酸(2,3-DPG)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

ChickenLeukemiainhibitoryfactor,LIF檢測試劑盒雞白血病抑制因子(LIF)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

載玻片細胞JNK/SAPK蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次

MouseGATAbindingprotein4,GATA4ELISAKit小鼠GATA結(jié)合蛋白4(GATA4)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

人腹膜毛細血管內(nèi)皮細胞小鼠細胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

中文名稱   方法   規(guī)格

小鼠γ干擾素(IFN-γ)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠胰島素樣生長因子2(IGF-2)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。

1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復(fù)蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復(fù)蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。

T-25培養(yǎng)瓶充滿培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。本公司的所有產(chǎn)品僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)科研等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用