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細胞簡介：

人主動脈內(nèi)皮分離自主動脈組織；主動脈是體循環(huán)的動脈主干。其運行路徑為：升主動脈起于左心室，至右側第2胸肋關節(jié)高度移行為主動脈弓，弓行向左后至第4胸椎體下緣移行為降主動脈；在第12胸椎體高度穿膈的主動脈裂孔移行為腹主動脈，以上為胸主動脈，至第4腰椎體下緣分為左、右髂總動脈；髂總動脈在骶髂關節(jié)高度分為髂內(nèi)、外動脈。主動脈內(nèi)皮細胞是覆蓋在主動脈內(nèi)面的單層細胞，可分泌一系列血管活性物質而保持血管穩(wěn)態(tài)，當其受到炎癥或其它因素刺激后穩(wěn)態(tài)被破壞而導致一些心血管疾病的發(fā)生。因此，主動脈內(nèi)皮細胞已成為研究心血管疾病發(fā)病機制及治療藥物的工具。內(nèi)皮細胞或血管內(nèi)皮是一薄層的專門上皮細胞，由一層扁平細胞所組成。它形成血管的內(nèi)壁，是血管管腔內(nèi)血液及其他血管壁（單層鱗狀上皮）的接口。內(nèi)皮細胞是沿著整個循環(huán)系統(tǒng)，由心臟直至小的微血管。

方法簡介：

公司實驗室分離的人主動脈內(nèi)皮采用-膠原酶聯(lián)合消化法結合差速貼壁法、并通過內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

公司實驗室分離的人主動脈內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：

包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 內(nèi)皮細胞樣

傳代特性 可傳2-3代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

公司正在出售的產(chǎn)品：

豚鼠白介素22(IL-22)檢測試劑盒 ，英文名： IL-22 ELISA Kit

Human ubiquitin protein (Ub) ELISA Kit 人泛素蛋白(Ub)檢測試劑盒

RabbitIerleukin1β,IL-1βELISAKit 兔子白介素1β(IL-1β)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforBeta-EP(RabbitBeta-Endorphin)ELISAKit兔子β內(nèi)啡肽

細菌樣品二維電泳裂解液用于細菌蛋白二維電泳

RabbitGlycatedhemoglobinA1c,A1cELISAKit兔糖化血紅蛋白A1c(A1c)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

HA重組甲型流感 H5N1 (A/duck/Laos/3295/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

ShK(Stichodactyla helianthus Neurotoxin 0.1mgShK(Stichodactyla helianthus Neurotoxin)-(Gln11) ?？窠?jīng)毒素(35肽)

SERPINF1重組人 SerpinF1 / PEDF 蛋白 Protein

IL5 Protein Human 重組人 IL5 / Interleukin 5 蛋白

LXN Protein Human 重組人 Latexin / LXN / TCI 蛋白

ShK(Stichodactyla helianthus Neurotoxin 0.1mgShK(Stichodactyla helianthus Neurotoxin)-(Gln11) ?？窠?jīng)毒素(35肽)

IL5 Protein Human 重組人 IL5 / Interleukin 5 蛋白

HA重組甲型流感 H5N1 (A/duck/Laos/3295/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

LXN Protein Human 重組人 Latexin / LXN / TCI 蛋白

SERPINF1重組人 SerpinF1 / PEDF 蛋白 Protein

豚鼠超氧化物歧化酶1(SOD1)檢測試劑盒 ，英文名： SOD1 ELISA Kit

Human ierferon regulatory factor (IRF) ELISA Kit 人干擾素調節(jié)因子(IRF)檢測試劑盒

Rabbitmyelinbasicprotein,MBPELISAKit 兔子髓0脂堿性蛋白(MBP)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforAZU(Humanazurocidin)ELISAKit人天青殺素

線蟲細胞分離試劑盒20次

RabbitapoproteinB100,apo-B100ELISAKit兔載脂蛋白B100(apo-B100)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

人主動脈內(nèi)皮細胞人中性粒細胞防御素1-3(HNP1-3)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人嗜酸性粒細胞陽離子蛋白(ECP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人血漿抗凝蛋白S(PS)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人血漿抗凝蛋白C(PC)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

注意事項：

1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等，確保細胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現(xiàn)問題，責任由客戶自行承擔。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正?，F(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。

4. 貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和我司技術部溝通交流。由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細胞僅供科研使用。

8. 備注：運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。收到細胞后次傳代建議1：2傳代 。

9.注意： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。