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① 組織塊培養(yǎng)法

組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

② 消化培養(yǎng)法

③ 懸浮細胞培養(yǎng)法

對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

④器官培養(yǎng)

器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

產(chǎn)品名稱：兔骨髓基質(zhì)細胞

英文名稱：Rabbit Bone Marrow Stromal Cells

組織來源：骨髓

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

兔骨髓基質(zhì)分離自骨髓；骨髓是機體的造血組織，位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動物的骨髓分兩種：紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細胞、血小板和各種白細胞。血小板有止血作用，白細胞能殺滅與抑制各種病原體，包括細菌、病毒等；某些淋巴細胞能制造抗體。因此，骨髓不但是造血器官，它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨（如肱骨、股骨）的骨髓腔和扁平骨（如髂骨）的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中，是一種海綿狀的組織，能產(chǎn)生血細胞的骨髓略呈紅色，稱為紅骨髓。出生時，紅骨髓充滿全身骨髓腔，隨著年齡增大，脂肪細胞增多，相當部分紅骨髓被黃骨髓取代，后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓基質(zhì)細胞是一類具有多向分化潛能的干細胞，其中部分細胞有自我復制、高度增殖和多向分化能力，在特定培養(yǎng)條件下可向骨、軟骨、神經(jīng)膠質(zhì)細胞、心肌、骨胳肌、脂肪細胞、血管內(nèi)皮細胞等間葉組織細胞轉化。骨髓基質(zhì)細胞在自然條件下主要分化為成骨細胞，在不同的培養(yǎng)條件下其分化途徑不同，其在成骨細胞與成脂細胞分化之間呈反向變化。

實驗室分離的兔骨髓基質(zhì)采用密度梯度離心法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

實驗室分離的兔骨髓基質(zhì)經(jīng)CD90免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細胞形態(tài)：成纖維細胞樣

傳代特性：可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

兔骨髓基質(zhì)體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

取材→分離→培養(yǎng)和維持

1、取材

人和動物細胞的取材是原代細胞培養(yǎng)成功的首要條件，直接影響細胞的體外培養(yǎng)。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應嚴格無菌

③ 防止機械損傷

④ 去除無用組織和避免干燥

⑤ 應注意組織類型、分化程度、年齡等

⑥ 作好記錄

2、分離

人或動物體內(nèi)(或胚胎組織)由于多種細胞結合緊密，不利于各個細胞在體外培養(yǎng)中生長繁殖，必須將現(xiàn)有的組織塊充分散開，使細胞解離出來。

(1)懸浮細胞的分離方法

組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細胞。

(2)實體組織材料的分離方法

對于實體組織材料，由于細胞間結合緊密，為了使組織中的細胞充分分散，形成細胞懸液，可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法。

① 機械分散法

特點:簡便、快速,但對組織機械損傷大，而且細胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀)，應用酶的生化作用和非酶的化學作用進一步使細胞間的橋連結構松動，使團塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時再采用機械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細胞團塊得以較充分的分散，制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液，接種培養(yǎng)后，細胞容易貼壁生長。

大鼠Ⅸ型膠原α1(COL9α1)檢測試劑盒 ，英文名： COL9α1 ELISA Kit

Human vanillylmandelic acid (VMA) ELISA Kit 人垂草扁桃酸(VMA)檢測試劑盒

GoatIerleukin-2receptor,IL-2RELISAkit 山羊白介素2受體(IL-2R)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforC3a(MouseComplemefragme3a)ELISAKit小鼠補體片斷3a

細菌鈣鎂ATP酶(Ca++/Mg++-ATPase)活性比色法定量檢測試劑盒20次

RabbitThrombinactivatablefibrinolysisinhibitor,TAFIELISAKit兔纖溶抑制因子/激活的纖溶抑制物(TAFI)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

TNFSF15重組大鼠 TNFSF15 / TL1A 蛋白 (Fc 標簽) Protein

GABRA1(gamma-aminobutyric acid (GABA 0.5mgGABRA1(gamma-aminobutyric acid (GABA) A receptor, alpha 1) γ1氨基A型受體α1抗原

CD276重組人 B7-H3 / CD276 蛋白 Protein

IL36A Protein Human 重組人 IL1F6 / IL36 蛋白 (aa 6-158)

REG4 Protein Mouse 重組小鼠 REG4 / GISP / RELP 蛋白

GABRA1(gamma-aminobutyric acid (GABA 0.5mgGABRA1(gamma-aminobutyric acid (GABA) A receptor, alpha 1) γ1氨基A型受體α1抗原

IL36A Protein Human 重組人 IL1F6 / IL36 蛋白 (aa 6-158)

TNFSF15重組大鼠 TNFSF15 / TL1A 蛋白 (Fc 標簽) Protein

REG4 Protein Mouse 重組小鼠 REG4 / GISP / RELP 蛋白

CD276重組人 B7-H3 / CD276 蛋白 Protein

豚鼠端粒酶(TE)檢測試劑盒 ，英文名： TE ELISA Kit

Human dopamine D1 receptor (D1R) ELISA Kit 人多巴胺D1受體(D1R)檢測試劑盒

Rabbitsolubleadhesionmolecules,SamELISAKit 兔子可溶性粘附分子(Sam)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforBeta-TGELISAKit大鼠β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白

細菌同化型鹽還原酶活性比色法定量檢測試劑盒20次

rabbitInsulin-likegrowthfactor2,IGF-2ELISAKit兔子胰島素樣生長因子2(IGF-2)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

兔骨髓基質(zhì)細胞人轉化生長因子α(TGF-α)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人基質(zhì)細胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISAkit   ELISA.   96T/48T

人干細胞因子受體(SCFR)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人干細胞因子/肥大細胞生長因子(SCF/MGF)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。

1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。

T-25培養(yǎng)瓶充滿培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。本公司的所有產(chǎn)品僅用于科學研究或者工業(yè)科研等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用